2018年6月8日,笔者参加了由苏州市实验动物协会、江苏省实验动物协会青年工作委员会举办的“江苏省模式动物应用与管理培训论坛”,会议邀请了南京大学生物医学研究院、剑桥-苏大基因资源中心等专家讲解了基因工程模式动物构建与应用、实验动物质量管理与控制相关知识。专家对于小鼠基因工程模式动物的构建方法及应用实例、小鼠基因敲除技术进行了精彩的讲解,与会者获益匪浅。 以下就相关内容做一简单介绍。
近年来,基因工程动物模型的研究和应用获得了极大的发展,在新基因的功能鉴定和人类疾病的研究方面有着不可估量的应用前景,转基因动物模型和基因剔除动物模型为近年来研究热点,利用基因工程技术,我国小鼠疾病模型资源总量和小鼠模型创新创制均属于国际领先地位,可制备人源化小鼠模型、免疫缺陷模型、糖尿病模型、动脉粥样硬化模型以及肿瘤模型等,此外,还可采用CRISPR/Cas9,ZFN、Talen基因打靶技术构建转基因、基因敲除、基因敲入等动物模型,也可以接受动物模型的定制。基因工程小鼠模型的多样性,为新药研发提供了有力的技术支撑。
在完成人类基因组的DNA 测序后,探寻哺乳动物每个基因的功能成为生物医学领域的重要课题。科学家把与人类有超过90%基因同源性的小鼠作为研究对象,将小鼠胚胎干细胞进行单基因敲除后获得突变小鼠胚胎干细胞资源库,再将突变的小鼠胚胎干细胞培养成突变小鼠株,并对小鼠作表型分析,可系统性研究每个基因的功能、药物筛选和建立人类疾病模型,对人类生物学研究进程意义重大。
剑桥-苏大基因资源中心正是亚洲唯一的突变小鼠胚胎干细胞资源库。该项目由国际敲除小鼠基因联盟(IKMC)于2007年启动,采用基因捕获技术和基因打靶技术突变所有蛋白编码的小鼠基因,获得突变小鼠胚胎干细胞资源库。突变小鼠胚胎干细胞由桑格研究所领导的欧美联盟共同研发,全球仅有四份,其中三份分别在美国桑格研究所、德国(欧洲中心)和美国(北美中心),最后一份落户苏州,成为亚太地区唯一的干细胞资源库。利用该库丰富的的突变干细胞资源,科研人员可以制作基因敲除小鼠,进行诱导分化,该中心目前已完成代谢疾病小鼠模型、生物节律小鼠模型、呼吸系统小鼠模型等多种模型的制备,以往科研人员需花费近半年时间进口突变小鼠胚胎干细胞进行研究,现在1个月左右就可以收到相应的资源,大大缩短了资源进口的时间,降低了进口费用,为中国科研人员赢得更多的时间、更大的竞争力。
短短一天紧张的学习,笔者对于基因工程模式动物的构建以及应用,有了粗浅的了解,收获满满。